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重組蛋白表達時要怎么選擇合適的表達載體呢?

發(fā)表時間:2024-06-18 訪問次數(shù):880

  重組蛋白表達在現(xiàn)代生命科學(xué)研究中起著至關(guān)重要的作用,通過DNA重組技術(shù)來產(chǎn)生所需目的蛋白的方式。而對于重組蛋白表達來說,表達載體是基因表達所需的必要元素,比如啟動子、序列、終止密碼子、轉(zhuǎn)錄終止序列等。就目前來說,有多種表達系統(tǒng)選擇,比如大腸桿菌、昆蟲細胞、哺乳動物、枯草芽孢桿菌以及酵母表達系統(tǒng),需要結(jié)合不同情況來選擇載體。

重組蛋白表達

  那么,我們具體通過哪些因素來選擇表達載體呢?

  1、表達系統(tǒng)

  對于不同表達系統(tǒng)來說,其選擇的載體是各不相同的,所以,需要結(jié)合不同的系統(tǒng)來選擇合適的載體;

  2、載體大小

  一般這個時候,我們需要結(jié)合DNA片段是大還是小,為了操作方便,我們一般采用載體相對較小的分子,這樣所得的蛋白更穩(wěn)定;

  3、蛋白標簽

  蛋白標簽我們一般選擇較短的肽段,只有有了這類標簽,對于那些缺乏檢測方法的蛋白來說,能夠輕松實現(xiàn)檢測;

  4、蛋白應(yīng)用

  根據(jù)目標蛋白的下游應(yīng)用,表達載體可以搭配一些標簽使用,這些特定的標簽有助于研究目的蛋白的特性,以及蛋白之間的相互作用;

  5、啟動子

  啟動子的類型有很多,它在很大情況下制約著蛋白的表達。所以,無論是原核表達還是真核表達,我們都需要結(jié)合蛋白的特性及使用目的來挑選合適的啟動子,這樣才能更好地進行蛋白的表達;

  6、標記選擇

  標記其實就是一種基因,她可以為目的蛋白添加一種適合人工選擇的性狀。這種標記多選擇康生物基因,主要目的是方便后期的陽性克隆篩選;

  重組蛋白表達的作用不僅于此,其使用范圍非常的廣泛,當然了,對于不同的表達環(huán)境來說,需要結(jié)合不同的表達載體來進行表達。在重組蛋白表達的過程中,有很多細節(jié)問題需要注意,這樣才能更好地實現(xiàn)表達。更多重組蛋白表達,敬請關(guān)注普健生物。

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