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什么是單克隆抗體?它的制備流程是什么?

發(fā)表時(shí)間:2022-08-10 訪問(wèn)次數(shù):1134

  單克隆抗體是由B細(xì)胞通過(guò)克隆所產(chǎn)生的具備高度均一且僅針對(duì)某種特定抗原表位所產(chǎn)生的抗體。一般來(lái)說(shuō),我們都會(huì)采用雜交瘤技術(shù)來(lái)對(duì)其進(jìn)行制備,同時(shí)結(jié)合細(xì)胞融合技術(shù),將具備該類分泌特異性抗體能力的B細(xì)胞進(jìn)行繁殖,產(chǎn)生B細(xì)胞雜交瘤。那么,單克隆抗體產(chǎn)生的基本原理是什么呢?

  我們知道,人體內(nèi)只有骨髓細(xì)胞是可以在體外實(shí)現(xiàn)生長(zhǎng)繁殖的,所以,我們一般用骨髓細(xì)胞來(lái)進(jìn)行其與淋巴細(xì)胞的結(jié)合,得到一種骨髓瘤細(xì)胞。這種雜交出來(lái)的細(xì)胞會(huì)繼承兩種親代細(xì)胞的特性,既具備淋巴細(xì)胞合成專一抗體的能力,又具備體外無(wú)限增殖的能力,所以,其非常適合用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞群,進(jìn)一步為我們提供特異性單克隆抗體。

  那么,單克隆抗體的具體制備流程有哪些呢?

  一般來(lái)說(shuō),單克隆抗體制備的流程相對(duì)規(guī)范化,雖然一些公司有著各自不同的制備流程,但是大體來(lái)說(shuō),一般也遵循如下的順序:免疫動(dòng)物、細(xì)胞融合、選擇性培養(yǎng)、篩選及純化、大規(guī)模生產(chǎn)。

  免疫動(dòng)物。一般我們采用目的抗原去免疫小鼠,通過(guò)注射預(yù)定的抗原,刺激相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞克隆、增殖,最終形成B淋巴細(xì)胞;

  細(xì)胞融合。取出小鼠脾臟并將其研磨,制備細(xì)胞懸浮液。然后將同系骨髓瘤細(xì)胞與細(xì)胞懸浮液按照一定比例混合,促使其融合;

  選擇性培養(yǎng)。其實(shí)就是雜交瘤細(xì)胞的篩選;

  篩選及純化。采用靈敏、快速、特異的免疫學(xué)方法,篩選出能產(chǎn)生所需單克隆抗體的陽(yáng)性雜交瘤細(xì)胞,然后對(duì)其進(jìn)行克隆擴(kuò)增。之后測(cè)量其免疫球蛋白類型、亞類、特異性、親和力、識(shí)別抗原的表位及其分子量后,之后在進(jìn)行凍存。

  大規(guī)模生產(chǎn)。搭建合適的生產(chǎn)環(huán)境,使得其可以大批量地生產(chǎn)特異性的單克隆抗體;

  雖然說(shuō)現(xiàn)在不同的廠家都有著不同的單克隆抗體制備方式,但是,總體來(lái)說(shuō),一般都遵循如上幾種方式,產(chǎn)生的抗體特異性強(qiáng),純度高,能夠在一定長(zhǎng)度上滿足我們的需求。當(dāng)然了,因?yàn)槿梭w的異源性,使得其無(wú)法達(dá)到我們的使用要求,之后,我們會(huì)和大家繼續(xù)介紹一種可以提高其使用效率的方式“抗體人源化”。普健生物為廣大用戶提供專業(yè)的單克隆抗體制備服務(wù),如果您有相關(guān)需求,歡迎來(lái)電咨詢。

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